Adek Gw yang Berubah Jadi Alay

Hari libur gini, bukannya jadi hari paling bahagia buat gw karna bebas dari laporan dan sgala macam yang berhubungan dengan kuliah, eh malah jadi hari-hari terburuk gw. Tiap kali gw libur, dijamin pulsa hp gw pasti ludes dipake sama adek gw yang blakangan ini lagi getol''nya pacaran. Sebenernya, baru kali ini gw denger adek gw punya pacar sih. Tapi masalahnya, pacarnya itu ada di cirebon. Nah lu, mati deh lu klo harus ngapelin tiap malem minggu, wkwkwkkw....yang ada tua di jalan deh. Tepos deh tuh pantat gara-gara harus duduk selama 3 jam. Itu juga perjalanan paling cepet kalo naik kereta yang ongkosnya aja udh bikin kantong bolong duluan. Ga lucu banget kalo sampe cirebon pantat udah tepos, eh dompet ikut-ikutan tepos juga wkwkwkwwk.....

Gw juga masih engga ngerti kenapa dia gw milih pacaran sama temen sekolahnya, atau setidaknya pacaran sama yang masih satu kota kek. Haahh....hidup ini emang susah, saking susahnya gw jadi harus ikut-ikutan di bikin susah sama dia. Awalnya sih dia kenal pacarnya itu dari  pacebook, eh lama kelamaan malah jadian. Ya sudahlah, dengan dukungan dari media komunikasi mulailah mereka sms-smsan, trus telpon-telponan deh. Heuh....dasar anak SMA gudangnya ababil dan dewabil, ga punya doku buat beli pulsa, mulailah berani malakin gw sebagai kakaknya. Jelas gw ga kasih, tapi sebagai gantinya pulsa gw yang kena sedot. Entah bagaimana, kelakuan adek gw itu makin lama makin alay. Satu cewe ga cukup, mulailah dia menggombali cewe-cewe lainnya, sampe-sampe udah jam dua malem aja, itu hp krang...kring...krang....kring.....terus!!! rrrggghhh.....gw kesel banget. Masalahnya, kenapa ya kok mau-maunya itu cewe-cewe di gombalin sama adek gw, mulai dari anak kuliahan yang lebih tua dari gw, anak smp yang ngebet banget mau jadi pacarnya adek gw dannn cewe SMA yang kalo denger suaranya aja, hhheeuuuhhh.....rasanya mau gw tabokin deh, pake sok-sok akrab lagi sama gw. Gw sih bukannya gimana-gimana ya, tapi...."PULSA GW ABIS WOY GARA-GARA BUAT NELPONIN LU....LU....PADA yang alay ababil. Gw ga ngerti, kalo gw meratiin adek gw telpon-telponan sama pacarnya, kenapa ya bisa sampe bikin dia nangis, sok dewasa dan sok manis. Iiihhh.....geli sendiri gw kalo dengernya. Yang paling aneh, bisa-bisanya dia nangis buat cewe yang entah dimana keberadaannya, belum terdeteksi. Dia tuh ga sadar ya, hey bro...lu itu cowo, masa semudah itu nangis ditelpon waktu lo lagi telpon-telponan sama cewe lo. hhahh....dikamus gw aja ga ada tuh nangis-nangis gitu. Easy going aja kali.....!!!

Sekarang ini alaynya adek gw semakin akut semenjak hpnya dia di sita sama bokap gw. Walaupun itu hape ga ada pulsanya, tetep aja hp gw dibajak sama dia. Jadilah gw mati gaya dirumah. mau keluar, siapa yang mau gw ajakin muter'' nemenin gw, jadi tukang ojek gw karna gw ga bisa naik motor dan ga akan pernah dibolehin naik motor. Siapa juga yang mau ngebayarin gw makan dan minumnya karna gw bener-bener bokek banget. Penghasilan nihil. Abis buat fieldtrip yang cukup'' menguras kantong untuk ukuran perjalanan 3 hari 2 malem. Entah bagaimana lagi gw harus ngadepin adek laki-laki gw satu-satunya yang sama sekali ga pernah bisa gw marah ke dia. Entah kenapa....

Dulu, adek gw gak alay-alay amat ya. karna sebenernya disetiap pribadi manusia ada sifat alay yang memang udah bawaan dari lahir, cuma tergantung pribadi masing-masing juga, mau menampakkan sifat/sikap alaynya itu dimana dan kapan. Alay itu perilaku yang berlebih yang diekspresikan secara tidak tepat pada waktu dan tempat yang tidak pas. Beti sih sama lebay. Orang yang kelewat lebay itulah alay. Saat yang paling tepat kalo lo mau jadi alay ya saat di mana lo semua lagi curhat sama orang lain. Barulah lu boleh explore sifat alay lo itu, karna ga salah juga dong, namanya juga curhat, kalo lo masang tampang yang flat, gimana orang mau tertarik dengerin cerita lo yang lebay yang bikin lo jadi manusia alay hehe.....

Sekian dulu sharing gw mengenai kedongkolan gw terhadap sikap lebaynya adek gw yang udah berlanjut merubah dirinya menjadi manusia alay.Selamat buat adek gw yang udah resmi masuk ke komunitas Alayerz wkwkwkw.....piiss

Uji Protein I

Pendahuluan

            Protein adalah makromolekul yang paling berlimpah di dalam sel hidup dan merupakan 50% atau lebih berat kering sel (Lehninger 1982). Protein merupakan molekul penyusun makhluk hidup. Protein dapat ditemukan didalam seluruh bagian sel. Semua protein dibagun dari rangkaian dasar berupa 20 asam amino yang berikatan kovalen dalam urutan yang khas. Seluruh asam amino memiliki peptida.  Ciri utama molekul protein yaitu, memiliki berat molekul yang besar; terdiri atas 20 macam asam amino; terdapat ikatan kimia lain yang menyebabkan terbentuknya lengkungan-lengkungan rantai polipeptida menjadi struktur tiga dimensi protein; Strukturnya tidak stabil terhadap beberapa faktor seperti pH, radiasi, temperatur, medium pelarut organik, dan detergen; umumnya reaktif dan sangat spesifik. 

 Asam amino merupakan bagian struktur protein dan menentukan banyak sifatnya yang penting (Wirahadikusumah 1977). Glisin merupakan asam amino pertama yang diisolasi dari hidroksilat protein. Asam amino dapat dianalisis dengan menggunakan uji Millon, uji Hopkins-Cole, uji xantoproteat, uji belerang dan uji biuret. Tiap-tiap uji akan menghasilkan hasil reaksi yang berbeda terhadap bahan uji. Uji Millon akan menghasilkan warna merah pada uji positifnya, uji xantoproteat akan menunjukkan warna orange pada uji positifnya, uji belerang akan menunjukkan warna hitam pada uji positifnya, uji biuret akan menunjukkan warna biru keunguan pada uji positifnya, sedangkan pada uji Hopkins-Cole akan menunjukkan cincin ungu pada uji positifnya. Namun, uji Hopkins-Cole tidak dilakukan.

Tujuan

            Praktikum bertujuan untuk mengetahui kandungan asam amino secara kualitatif  yang ada di dalam albumin, gelatin, kasein, pepton dan fenol dengan cara uji Millon, uji ninhidrin, uji belerang, uji xantoproteat, dan uji biuret, serta mengetahui reaksi yang terjadi pada uji tersebut.

Alat dan Bahan

            Alat-alat yang digunakan pada praktikum kali ini ialah pipet mohr 10 ml, pipet tetes, bulp, gelas piala 100 ml dan 250 ml, botol semprot, tabung reaksi, kaki tiga, kasa, pembakar gas, dan gegep kayu.

            Bahan-bahan yang digunakan pada praktikum kali ini ialah pereaksi Millon, albumin 2% dan 0.02%, gelatin 2% dan 0.02%, kasein 2% dan 0.02%, pepton 2% dan 0.02%, fenol 2% dan 0.02%, pereaksi Hopkins-Cole, H₂SO₄ pekat, pereaksi ninhidrin, NaOH 10% dan pekat, Pb-asetat 5%, HNO₃ pekat, CuSO₄ 0.1%, dan akuades.

Prosedur Kerja

UJi Millon. Lima tetes pereaksi Millon ditambahkan ke dalam tabung reaksi berisi 3 ml larutan protein. Campuran lemudian dipanaskan baik-baik. Warna larutan akan hilang pada saat pemanasan jika pereaksi yang digunakan terlalu banyak.  Percobaan ini diujikan terhadap larutan albumin, gelatin, kasein, pepton, dan fenol dengan kosentrasi masing-masing larutan sebesar 2%.

Uji Ninhidrin. Larutan ninhidrin 0.1 % sebanyak 0.5 ml ditambahkan ke dalam tabung reaksi berisi 3 ml larutan protein. Campuran tersebut kemudian dipanaskan dalam penangas air mendidih selama 10 menit. Perubahan warna larutan yang terjadi diperhatikan. Uji ini dilakukan terhadap larutan albumin, gelatin, kasein, pepton, dan fenol dengan konsentrasi masing-masing 0.02 %.

Uji belerang. Larutan protein sebanyak 2 ml ditambahkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 5 ml NaOH 10% kemudian dididihkan beberapa menit. Tambahkan 2 tetes larutan Pb-Asetat 5 % dan pemanasan dilanjutkan selama beberapa menit. Perubahan warna larutan diamati. Uji ini dilakukan terhadap larutan albumin 2 %, gelatin, kasein, pepton, dan fenol dengan konsentrasi masing-masing 0.02%.

Uji Xantoproteat. Larutan protein sebanyak 2 ml dimasukkan ke dalam tabung reaksi berisi 1 ml HNO3 pekat kemudian dicampurkan dan dipanaskan dengan hati-hati. Munculnya warna jingga (kuning tua). Campuran kemudian didinginkan lalu ditambahkan pertetes larutan NaOH pekat sampai larutan menjadi basa. Perubahan warna yang terjadi diamati. Uji ini dilakukan terhadap larutan albumin 2%, gelatin 2%, kasein, pepton, dan fenol dengan konsentrasi masing-masing 0.02%.

Uji Biuret. NaOH 10% sebanyak 1 ml ditambahkan ke dalam tabung reaksi berisi 3 ml larutan protein lalu dikocok. Larutan CuSO4 0.1% sebanyak 1 tetes ditambahkan ke dalam campuran. Campuran dikocok dan apabila tidak timbul warna ditambahkan kembali 1 atau 2 tetes CuSO4 0.1%. Uji ini dilakukan terhadap larutan albumin 2%, gelatin, kasein, pepton, dan fenol dengan konsentrasi masing-masing 0.02%.

Data Pengamatan

Tabel 1 Hasil Uji Millon

Bahan Uji (2%)	Hasil Pengamatan (+/-)	Perubahan Warna Larutan
Albumin	─	Putih susu → Kuning
Gelatin	+	Tidak Berwarna → Merah
Kasein	─	Tidak Berwarna → Tidak Berwarna
Pepton	─	Kuning → Kuning Pekat
Fenol	+	Tidak Berwarna → Merah

Keterangan :

(+)   = Mengandung Protein

(-)   =  Tidak Mengandung Protein

Tabel 2 Hasil Uji Ninhidrin

Bahan Uji (2%)	Hasil Pengamatan (+/-)	Perubahan Warna Larutan
Albumin	+	Tidak Berwarna → Biru Ungu
Gelatin	++	Tidak Berwarna → Biru Ungu
Kasein	─	Tidak Berwarna → Tidak Berwarna
Pepton	+++	Kuning → Biru Ungu
Fenol	─	Tidak Berwarna → Tidak Berwarna

Keterangan :

(+)   = Mengandung Protein

(-)   =  Tidak Mengandung Protein

Tabel 3 Hasil Uji Belerang

Bahan Uji (0.02%)	Hasil Pengamatan (+/-)	Perubahan Warna Larutan
Albumin     (2%)	+	Tidak Berwarna → Hitam
Gelatin	─	Tidak Berwarna → Tidak Berwarna
Kasein	─	Tidak Berwarna → Tidak Berwarna
Pepton	─	Tidak Berwarna → Tidak Berwarna
Fenol	─	Tidak Berwarna → Tidak Berwarna

Keterangan :

(+)   = Mengandung Garam PbS

(-)   =  Tidak Mengandung Garam PbS

Tabel 4 Hasil Uji Xantoproteat

Bahan Uji (0.02%)	Hasil Pengamatan (+/-)	Perubahan Warna Larutan
Albumin (2%)	+	Tidak Berwarna → Ungu
Gelatin	+	Tidak Berwarna→Biru SangatTipis
Kasein	+	Tidak Berwarna → Biru Tipis
Pepton	+	Kuning → Biru Sangat Tipis
Fenol	+	Tidak Berwarna → Biru Tipis

Keterangan :

(+)  = Mengandung asam amino berinti benzena

(-)   = Tidak Mengandung asam amino berinti benzena

Tabel 5 Hasil Uji Biuret 

Bahan Uji (0.02%)	Hasil Pengamatan (+/-)	Perubahan Warna Larutan
Albumin (2%)	+	Tidak Berwarna → Ungu
Gelatin	+	Tidak Berwarna→Biru SangatTipis
Kasein	+	Tidak Berwarna → Biru Tipis
Pepton	+	Kuning → Biru Sangat Tipis
Fenol	+	Tidak Berwarna → Biru Tipis

Keterangan :

(+)  = Mengandung asam amino yang memiliki ikatan peptida

(-)   = Tidak mengandung asam amino yang memiliki ikatan peptida

Pembahasan

Protein memiliki lima buah ciri utama. Ciri-ciri tersebut yaitu berat molekulnya yang relatif besar sehingga protein tergolong ke dalam suatu makromolekul. Ciri kedua yaitu umumnya hanya terdiri dari 20 macam asam amino dan asam amino tersebut dapat membantuk suatu ikatan peptida secara kovalen. Ikatan peptida ini dihasilkan dari ikatan yang dibentuk oleh beberapa asam amino. Ikatan ini terjadi antara gugus α-karboksil dari satu asam amino dengan gugus α-amino dari asam amino yang lainnya.

Gambar 1 Ikatan peptida

Ciri protein yang ketiga yaitu adanya ikatan kimia lain sehingga menyebabkan terbentuknya lengkungan dalam ikatan polipeptida menjadi struktur tiga dimensi. Contohnya seperti ikatan hidrogen, ikatan Van Der Waals, dan ikatan hidrofob (ikatan polar). Ciri yang keempat yaitu struktur dari molekul protein tidak stabil terhadap beberapa faktor seperti pH, radiasi, dan temperatur. pH yang sangat tinggi (asam atau basa), radiasi yang sangat besar, dan suhu yang sangat tinggi dapat merusak struktur dari protein tersebut sehingga menyebabkan protein tersebut tidak bermanfaat lagi.  Ciri yang kelima yaitu protein umumnya sangat reaktif dan sangat spesifik. Hal ini disebabkan oleh adanya gugus samping yang sangat reaktif dan memiliki susunan yang khas pada struktur makromolekunya. Gugus samping yang terikat pada protein seperti gugus kation, anion, hidroksil aromatik, amina, amida, tiol, dan gugus heterosiklik. Asam amino dapat diklasifikasikan ke dalam 4 golongan yaitu asam amino tak mengutub (non polar), asam amino mengutub (polar) tak bermuatan, asam amino bermuatan positif, dan asam amino bermuatan negatif. Rumus umum dari asam amino yaitu :

Gambar 2 Rumus umum asam amino 

                          

Pengujian di dalam percobaan yaitu untuk mengidentifikasi adanya kandungan asam amino yang terdapat di dalam sampel larutan protein. Sampel yang diujikan yaitu albumin, gelatin, kasein, pepton, dan fenol dengan konsentrasi dari masing-masing sampel yaitu 2% dan 0.02%. Kelima sampel protein tersebut diuji dengan lima buah uji yaitu uji Millon, uji ninhidrin, uji belerang, uji Xantoproteat, dan uji biuret.

Uji Millon. Reagen Millon terdiri dari merkuri dan ion merkuro dalam asam nitrat dan asam nitrit. Sampel protein yang mengandung asam amino ketika direaksikan dengan reagen Million akan membentuk garam merkuri dari tirosi yang ternitrasi. Garam yang terbentuk ini akan memberikan warna yang spesifik yaitu warna merah. Warna yang terbentuk tersebut mengindikasikan bahwa sampel yang digunakan mengandung asam amino. Pengujian Millon dilakukan dengan cara mencampurkan 5 tetes reagen Millon ke dalam dalam tabung reaksi berisi 3 ml sampel. Campuran yang kemudian dipanaskan bertujuan untuk mempercepat reaksi antara reagen dengan sampel sehingga terbentuknya garam merkuri lebih cepat. Penambahan reagen tidak boleh terlalu banyak karena warna yang terbentuk pada saat pemanasan akan menghilang.

Hasil yang diperoleh dari percobaan menunjukkan bahwa sampel yang mengandung asam amino yaitu pada sampel larutan gelatin dan fenol dengan konsentrasi masing-masing 2%. Sedangkan sampel yang tidak mengandung asam amino yaitu pada larutan albumin, kasein, dan pepton dengan konsentrasi masing-masing 2%. Warna yang terbentuk dari albumin yaitu kuning (awalnya berwarna putih susu), pada kasein tidak terjadi perubahan warna (awalnya tidak berwarna), dan pada sampel pepton terbentuk warna kuning pekat (awalnya berwarna kuning).

Uji Hopkins-Cole. Uji ini tidak dilakukan dalam praktikum. Pereaksi Hopkins-Cole terbuat dari asam oksalat dan serbuk magnesium dalam air. Larutan protein yang mengandung triptofan dapat direaksikan dengan pereaksi Hopkins-Cole yang mengandung asam glioksilat. Triptofan dapat berkondensasi dengan sejumlah aldehida dengan bantuan asam kuat yang akan membentuk senyawa berwarna. Asam kuat akan menyebabkan terbentuknya cincin ungu pada batas di antara kedua larutan. 

Uji ninhidrin. Pengujian keberadaan asam amino dalam sampel dilakukan  menggunakan larutan ninhidrin yang ditambahkan ke dalam tabung reaksi berisi 3 ml larutan sampel. Pemananasan yang dilakukan pada campuran ini bertujuan agar mempercepat reaksi sehingga warna spesifik dari asam amino yang terkandung dapat teramati. Hasil reaksi positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna biru-ungu yang intensitasnya dapat diketahui dengan menggunakan spektrofotometer. Semua asam amino dan peptida yang mengandung gugus α-amino bebas akan memberikan reaksi positif berwarna biru-ungu kecuali pada prolin dan hidroksiprolin. Gugus amino yang terdapat pada kedua asam amino ini tersubstitusi sehingga akan memberikan hasil reaksi positif dengan terbentuknya warna kuning. Reaksi yang terjadi pada uji ninhidrin yaitu:

Gambar 3 Reaksi pada uji ninhidrin

Hasil yang diperoleh dari percobaan menunjukkan bahwa sampel yang mengandung asam amino yaitu pada larutan albumin, gelatin, dan pepton dengan konsentrasi masing-masing yaitu 2%. Sedangkan sampel yang tidak mengandung asam amino yaitu pada kasein 2% dan pepton 2%

Uji belerang. Pengujian belerang dilakukan dengan mencampurkan 2 ml larutan protein ke dalam 5 ml NaOH 10% yang kemudian dipanaskan. Penambahan NaOH bertujuan untuk mendenaturasi protein sehingga ikatan yang menghubungkan atom S dapat terputus oleh Pb-asetat membentuk PbS. Penambahan Pb-asetat bertujuan untuk membentuk garam berwarna hitam. Pemanasan dilakukan untuk mempercepat pembentukan garam tersebut. Garam yang dihasilkan yaitu garam PbS yang berwarna hitam. Garam ini terbentuk dalam suasana basa dan berasal dari sulfur (belerang) pada molekul sistein yang bereaksi dengan Pb-asetat. Reaksinya yaitu :

  

Gambar 4 Reaksi pada uji belerang

Hasil percobaan menunjukkan bahwa pembentukan garam PbS hanya pada sampel albumin 2% yang menunjukkan reaksi positif dengan terbentuknya warna hitam pada saat ditambahkan Pb-asetat dalam keadaan dipanaskan. Sampel yang lainnya tidak membentuk garam PbS meskipun telah ditambahkan Pb-asetat secara berlebih. Hasil uji menunjukkan albumin mengandung sistein ataupun metionin.

Uji Xantoproteat. Uji xantoproteat akan menghasilkan warna orange pada reaksi yang menghasilkan turunan benzena dengan penambahan basa. Uji xantoproteat digunakan untuk asam amino yang mengandung inti benzena (Harper 1980). Reaksi yang digunakan adalah reaksi nitrasi pada inti benzena yang terdapat di protein oleh asam nitrat pekat. Reaksi ini positif untuk triptofan, fenilalanin, dan tirosin. Warna hasil reaksi dengan asam nitrat pekat adalah kuning tua, sedangkan warna orange muncul ketika reaksi ditambahkan dengan NaOH sebagai basa. Hasil percobaan menunjukkan albumin, pepton dan fenol positif memiliki inti benzena sedangkan pada gelatin dan kasein menunjukkan warna kuning setelah penambahan basa. Fenol mengalami perubahan warna dari kuning menjadi orange pekat, sedangkan albumin dan pepton mengalami perubahan warna dari kuning menjadi orange. Orange pekat pada fenol menunjukkan adanya inti benzene pada gugus fenol. Hal itu memang sangatlah tepat karena fenol memang memiliki gugus benzena.        

               Uji Biuret. Uji biuret menghasilkan warna biru keunguan pada asam amino yang mengandung kompleks Cu²⁺, NH, dan gugus CO dari rantai peptidanya. Senyawa biuret dihasilkan dari urea yang dipanaskan didalam air panas. Suasana basa akan memberikan warna biru keunguan pada asam amino yang bereaksi dengan CuSO₄. Suasana basa dihasilkan dari penambahan NaOH 10% sedangkan penambahan CuSO₄ 0,1% berfungsi untuk menghasilkan warna biru keunguan pada reaksi yang positif memiliki gugus Cu²⁺, NH dan gugus CO pada ikatan peptidanya. Albumin memiliki gugus bangun yang kompleks dan mengikat dua atau lebih asam amino esensial, sehingga terbentuk ikatan peptida. Semakin banyak ikatan peptida yang dimiliki warna ungu yang terbentuk akan semakin nyata (Gilvery 1996). Gambaran proses terbentuknya ikatan peptida:

Gambar 5 Proses terbentuknya ikatan peptida

  Hasil pengamatan menunjukan hasil positif untuk bahan uji albumin 2%, gelatin, kasein, pepton dan fenol. Hanya saja pada albumin dihasilkan warna violet, pada gelatin dihasilkan warna biru sangat tipis, pada kasein dihasilkan warna biru tipis, pada pepton dihasilkan warna biru sangat tipis dan pada fenol dihasilkan biru tipis. Warna yang dihasilkan dari uji biuret menunjukkan ikatan peptida terbanyak ada pada albumin, sedangkan pada bahan uji lain ikatan peptidanya tidak sebanyak albumin karena warna yang dihasilkan adalah biru muda. Jadi, ikatan peptida terbentuk apabila ada dua atau lebih ikatan peptide (Harrow 1954).  

Simpulan

Hasil yang diperoleh dari percobaan dengan berbagai uji dan reagen menunjukan bahwa sampel-sampel yang mengandung asam amino yaitu pada sampel gelatin dan fenol (uji Millon), albumin, gelatin, dan pepton (uji ninhidrin), albumin 2% (uji belerang), albumin (2%), pepton, dan fenol (uji xantoproteat), dan pada semua sampel protein (uji biuret).

Daftar pustaka

Gilvery, et al. 1996. Biokimia Suatu Pendekatan Fungsional Edisi 3. Surabaya: Airlangga University Press.

Harper, et al. 1980. Biokimia (Review Of Physilogical Chemistry) Edisi 17. Jakarta: EGC

Harrow. 1954. Textbook Of Biochemistry 6^th Edition. U.S.A: Saunders Company.

Lehninger. 1982. Dasar-dasar Biokimia. Penerjemah: Maggy Thenawijaya. Jakarta: Erlangga.  

Wirahadikusumah, Muhammad. 1997. Biokimia: protein, enzim, dan asam. Bandung: Penerbit ITB. 

By: Deo Singgih Arestu, Dwi Eryono Kasiha dan, Mareti Primadona